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饲粮样品粉碎粒度对ADF和NDF尼龙滤袋法测定值的影响
作者:管理员    发布于:2016-05-07 15:36:22    文字:【】【】【

  魏时来(1961-),男甘肃静宁人,硕士,副教授,从事动物营养与饲料科学教学与研究工作。

  是评定反刍动物饲料(粮)营养的重要指标。植物性饲料中的中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、木质素及粗纤维等纤维物质的测定,都要对处理溶液进行过滤,才能够分离出纤维物质来计量。饲料样品的者观察到,目前饲料制样过程中,多用超高速微型样品粉碎机粉碎饲料样品,导致分析样品的颗粒特别细小,这对于粗蛋白质、钙、磷等成分的测定(不用过滤)结果应该没有影响,而对于饲料中纤维物质的测定结果可能存在影响,因为过于细小的纤维颗粒会通过滤器的孔隙损失,使得纤维物质的测定值降低。

  而许多测定方法中,统一规定饲料样品粉碎粒度过40目筛,但有的资料没有作明确规定,也有规定粉碎至18目(mm粒径)的。目前,采用VanSoest的饲草分析方案测定的植物细胞壁纤维成分结果度不高,且所用试剂对操作人员有害,同时造成环境污染。中国农业大学肉牛研究中心研制的纤维滤袋(CAU滤袋)和配套设备,具备测定结果准确、成本较低等特点,但需要特殊的设备,在一般实验室难以普及。本试验研究采用尼龙滤袋(自制)测定法,探讨饲粮样品不同粉碎粒度对饲粮NDF和ADF测定结果的影响,为改进和规范饲料纤维物质的测定方法提供。

  1材料与方法1.1试验设计本试验采用肉羊全混合饲粮(饲料组分为苜蓿青干草30、小麦秸秆30、玉米20、豆粕10、麸皮10)作为研究样品,样品粉碎粒度设计为5个(个处理组),即全通过2mm孔径筛而1mm筛上物为80、40,全通过1mm筛而0. 5mm筛上1.2样品的制备按照设计要求,用碾槽、铁研钵和2mm、1mm、5mm的标准筛,不用超高速微型样品粉碎机粉碎,经过反复多次的碾磨和过筛,将饲粮制成5种粒度的分析样品,实际粉碎粒度见表1. 1.3尼龙滤袋的制做m)2种尼龙滤布,用尼龙线缝制成约5X3cm的尼龙滤袋,灼烧边缘,以防掉丝。

  测定指标和方法1.4.1尼龙滤袋处理前后质量变化的测定将尼龙滤袋于105C恒重后,用分析天平称重,按照NDF、ADF测定的过程,用中性洗涤剂和酸性洗涤剂处理,再于105C恒重,分析失重情况。

  表1饲粮样品粒度设计及实际粉碎粒度筛号设计粉碎粒度实际粉碎粒度样品粒度代号(处理编号)全过2mm筛1mm筛上物80 1mm筛上物40全过1mm筛0.5mm筛上物0 1.4.2酸性洗涤纤居(ADF)的测定准确称取1 g左右饲粮样品,装入已恒重的尼龙滤袋中,用尼龙线扎紧袋口,用油性记录笔编号,置于高型烧杯中,1个烧杯中可同时处理若干个样品。煮沸的酸性洗涤剂按照1个尼龙滤袋(1个样品)100mL的量加入。

  装入冷凝装置,立即置于电热板上微沸1h,每隔10min,用玻棒在烧杯内壁挤出滤袋中的溶液,并轻微搅动,以使酸性洗涤剂充分作用于样品。待煮沸完毕,用玻璃棒夹出滤袋,放入另一烧杯中,用沸水少量多次反复洗涤,洗涤过程中,要用粗玻棒或橡胶棒挤压滤袋,以使洗涤完全,洗至中性,挤干余水,再加丙酮每个样品20mL,洗涤1次,后将丙酮全部挤压干净。放入烘箱,105C下恒重。每个处理平行测定5次。

  1.4.3中性洗涤纤居(NDF)的测定除加入的试剂是已煮沸的中性洗涤剂溶液和0.5g无水亚硫酸钠外,其它过程同1.3.2. 5数据统计分析数据采用SPSS11.5软件的One―WayANO-VA法进行方差分析,差异显著后进行LSD法作多重比较,以0.05(差异显著)作为判断标准,结果用平均数士标准差表示。

  2结果与分析1酸性洗涤剂和中性洗涤剂处理对尼龙滤袋质量的影响从表2可以看出,尼龙滤袋经酸性洗涤剂和中性洗涤剂处理后的重量无明显变化,平均失重率的值都小于1.表2中。酸性洗涤剂处理后尼龙滤袋失重情况g项目酸性洗涤剂处理中性洗涤剂处理平均失重率一2.2饲粮样品粉碎粒度对ADF尼龙滤袋法测定值的影响显著(£>0.05)。而用400目尼龙滤袋测定的结果,1、2、3组显著高于5组,2组显著高于4组(P<由表3看出,用200目尼龙滤袋测定的不同粒0.05),其余各组之间差异不显著(P>度饲粮ADF的含量,其中1组显著高于3、4、5组,200目和400目尼龙滤袋测定的ADF值,均有随饲2、3组显著高于4、5组(PC0.05),其余组间差异不粮样品粉碎粒径的变小而降低的趋势。

  表3不同粉碎粒度饲粮样品ADF尼龙滤袋法测定结果处理组200目滤袋400目滤袋注:同行数据右注字母不同者,表示差异显著(P<0.05)有相同字母者,表示差异不显著(>0.05)表4不同粉碎粒度饲粮样品NDF尼龙滤袋法测定结果下同。

  项目200目滤袋400目滤袋2.3粉碎粒度对NDF尼龙滤袋法测定值的影响表4显示出,用200尼龙滤袋测定的NDF含量其中1组显著高于2、3、4、5组,2组显著低于3、4、5组(0.05),而3、4、5组之间差异不显著(P>0.05)。用400目尼龙滤袋测定的结果中,1、3、4组显著高于2、5组,其余各组间差异不显著(P>0.05)。相同目数尼龙滤袋测定的NDF值,除了2组外,均有随饲粮样品粉碎粒径的变小而降低的趋势。

  3讨论3.1酸性和中性洗涤剂对尼龙滤袋质量的影响酸性洗涤剂和中性洗涤剂处理后,尼龙滤袋的质量虽然有增减,但变幅很小,平均失重率的值都小于1即中、酸性洗涤剂处理对尼龙滤袋的质量影响不明显,因此在使用尼龙袋进行ADF和NDF测定时,可以不考虑尼龙袋质量变化对测定结果的影响。薛红枫等(2006)用CAU滤袋测定NDF、ADF和木质素含量时采用了空白处理,考虑了滤袋质量的影响,但时建青等(2005)测定NDF时,既没有考虑滤液对尼龙袋质量的影响,也未作说明。本试验研究未涉及粗纤维测定时,硫酸和氢氧化钠对尼龙滤袋质量的影响,虽然吴秋珏等(2006)用尼龙滤袋测定饲料中的粗纤维时没有考虑酸碱对尼龙袋质量的影响,但是,这需要进一步试验确定。

  3.2粉碎粒度对ADF和NDF滤袋法测定的影响饲料中的中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、木质素及粗纤维等纤维物质的测定,都要经过过滤,将试剂溶液处理后不溶解的纤维物质与溶解物进行分离,才能得出纤维物质的量来。而在制备饲料分析样品的过程中,粉碎和研磨能够使饲料颗粒变小,虽然植物细胞壁成分主要由纤维物质构成,存在一定的韧牢性,但是,过度的粉碎或研磨,也能使纤维物质变得很细。笔者观察到,目前饲料制样过程中,多用超高速微型样品粉碎机粉碎饲料样品,导致分析样品的颗粒特别细小,这对于粗蛋白质、钙、磷等成分的测定(不用过滤)结果应该没有影响,而对于饲料中纤维物质的测定结果可能存在影响,因为过于细小的纤维颗粒会通过滤器的孔隙损失,使得纤维物质的测定值降低。本试验结果说明了这个问题,随着饲粮样品粉碎细度的提高,中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的测定值有降低的趋势。2组(全过2mm筛,1mm筛上物40)用200目和400目尼龙滤袋测定的中性洗涤纤维结果均明显低于粒径更小的组,可能原因是不同测定人员在测定过程中,试剂溶液处理和洗涤程度不一致所致,这也是本课题将进一步规范测定操作过程所要解决的一个重要内容。

  在粗纤维测定上也有类似报道,李旺等(2004)控制饲料粒度为大颗粒(1.5mm)、中颗粒(1mm)和小颗粒(0.5mm)测定了粗纤维的含量,结果是大颗粒和小颗粒的测定值相近,但均显著高于中颗粒。郭萍(2004)报道,粗纤维的测定结果40目的比18目的高。目前尚未见饲料样品粉碎粒度与中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维测定结果关系方面的报道。

  4结论饲粮样品的粉碎粒度对用尼龙滤袋法测定的ADF和NDF的结果存在明显影响,饲粮样品的粒径越小,ADF和NDF的测定值就越低。因此,建议在饲料纤维物质测定中,应该统一规定饲料样品的

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